?。∟K）細(xì)胞在腫瘤免疫治療中展現(xiàn)出巨大潛力，并引起了廣泛關(guān)注。kaiyun官方開(kāi)云首個(gè)用于治療液體瘤的CAR-NK臨床試驗(yàn)成功驗(yàn)證了CAR-NK免疫療法的有效性和安全性。然而，CAR-NK在治療實(shí)體瘤方面仍面臨許多挑戰(zhàn)。腫瘤免疫和細(xì)胞治療領(lǐng)域一直在努力尋找能夠增強(qiáng)NK細(xì)胞抗腫瘤能力，尤其是對(duì)抗實(shí)體瘤的靶點(diǎn)，以改進(jìn)NK細(xì)胞工程和CAR-NK細(xì)胞療法。高通量篩選是一種識(shí)別免疫細(xì)胞靶點(diǎn)的有效方法，但由于NK細(xì)胞擴(kuò)增能力有限、轉(zhuǎn)染效率低以及難以進(jìn)行基因編輯等特性，目前尚未有在NK細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)CRISPR篩選的研究報(bào)道。

　　研究團(tuán)隊(duì)歷經(jīng)多年的技術(shù)攻關(guān)，利用AAV-轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)將CRISPR文庫(kù)整合到基因組中，克服了原代NK細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)和基因編輯效率低的障礙。研究通過(guò)四個(gè)平行的CRISPR篩選實(shí)驗(yàn)以及單細(xì)胞測(cè)序數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)了一個(gè)全新靶點(diǎn)——CALHM2，為NK細(xì)胞腫瘤免疫提供了新的治療靶點(diǎn)。kaiyun官方開(kāi)云

　　在這項(xiàng)研究中，研究團(tuán)隊(duì)利用AAV-轉(zhuǎn)座子技術(shù)高效整合CRISPR文庫(kù)到原代NK細(xì)胞基因組中，并在四種不同的腫瘤模型中進(jìn)行體內(nèi)高通量基因篩選。同時(shí)，團(tuán)隊(duì)利用單細(xì)胞RNA測(cè)序（scRNA-seq）描繪腫瘤浸潤(rùn)NK細(xì)胞亞群和轉(zhuǎn)錄組圖譜。

　　值得注意的是，兩組實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)了一個(gè)唯一共同的NK新靶點(diǎn)——CALHM2，敲除CALHM2的NK細(xì)胞具有更強(qiáng)的殺傷性和腫瘤浸潤(rùn)能力，CALHM2的mRNA能夠逆轉(zhuǎn)CALHM2敲除的NK細(xì)胞的表型。在人原代NK細(xì)胞中，CALHM2敲除增強(qiáng)了它們的細(xì)胞毒性、脫顆粒和細(xì)胞因子的產(chǎn)生。在對(duì)CAR-NK細(xì)胞具有抵抗力的實(shí)體瘤模型中，CALHM2敲除的CAR-NK細(xì)胞在體內(nèi)顯示出強(qiáng)大的抗腫瘤效果。

　　總的來(lái)說(shuō)，該研究發(fā)現(xiàn)了一個(gè)NK細(xì)胞的全新檢查點(diǎn)——CALHM2，并展示了通過(guò)敲除CALHM2來(lái)構(gòu)建增強(qiáng)型NK細(xì)胞療法的潛力 。